TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒（綠色熒光）

更新日期：2023-12-14

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廠商性質：生產廠家

所在城市：上海市

簡要描述：

TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒（Alexa Fluor 488）：
細胞凋亡時，部分DNA內切酶會被激活，進而切斷基因組DNA。TUNEL （TdT mediated dUTP Nick End Labeling）細胞凋亡檢測試劑盒可以用來檢測組織細胞在凋亡晚期過程中細胞核DNA的斷裂情況。

產品介紹：

品牌	其他品牌	供貨周期	現貨
應用領域	醫療衛生,生物產業

其原理是在末端脫氧核糖核苷酸轉移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT）的作用下，在基因組DNA斷裂時暴露出的3′-羥基（3′-OH）末端摻入被Alexa Fluor 488染料標志的dUTP，使凋亡的細胞被標志上綠色熒光，從而可以用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。

本試劑盒為直接熒光標志法的TUNEL染色，染色步驟簡便，應用范圍廣泛，可用于檢測冰凍切片、石蠟切片和培養細胞的凋亡情況。
包裝清單：

產品編號	產品名稱	包裝1	包裝2
SJ1272	TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒（Alexa Fluor 488）	20T	50T
●	說明書	一份

TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒產品組成：

編號	組分	20T	50T
試劑（A）	50× Proteinase K	20 ul	100 ul
試劑（B）	10 × DNase I Buffer	100 ul	500 ul
試劑（C）	DNase I	20 ul	100 ul
試劑（D）	Equilibration Buffer	2 ml	10 ml
試劑（E）	5×TdT Enzyme Buffer	200 ul	1 ml
試劑（F）	Recombinant TdT Enzyme	20 ul	100 ul
試劑（G）	Alexa Fluor 488-dUTP	20 ul	100 ul
試劑（H）	dATP	20 ul	100 ul
試劑（I）	封片劑（含DAPI）	1.5 ml	7.5 ml

保存條件：

-20 ℃保存，一年有效。

操作步驟：

1、樣本處理：

a) 石蠟切片：經二甲笨、酒精脫蠟，復水。脫蠟應充分。

b) 冰凍切片：流水沖洗，去除OCT包埋膠后，用純水洗3次。

c) 細胞飛片：用組織固定液固定后，用PBS洗三次，每次5分鐘。1% Triton X-100處理10分鐘，用PBS洗三次，每次5分鐘。

2、蛋白酶消化

將1ul 試劑（A）50× Proteinase K稀釋于50ul PBS中，滴加到組織上，37℃孵育10-20分鐘。消化結束后，用PBS洗三次，每次5分鐘。

3、陽性對照組織的處理

將組織用DNase I消化，以獲得斷裂的DNA，即成Tunel染色陽性的對照。陽性對照組織也可以選用小鼠的小腸組織切片。

純水	46 ul
試劑（B）: 10 × DNase I Buffer	5 ul
試劑（C）: DNase I	1 ul
共計	50 ul

將50 ul DNase I消化液滴加于組織上，37℃孵育10-30分鐘，消化結束后，用PBS洗三次，每次5分鐘。

4、Tunel標志染色:

Tunel標志染色前用50 ul Equilibration Buffer孵育標本5-10分鐘。孵育過程中按下表配制Tunel染色工作液。去除標本上的Equilibration Buffer后，直接滴加50ul Tunel染色液，37℃孵育1-2小時，染色結束后，用PBS洗三次，每次5分鐘。

試劑（D）Equilibration Buffer	37 ul
試劑（E）5×TdT Enzyme Buffer	10 ul
試劑（F）Recombinant TdT Enzyme	1 ul
試劑（G）Alexa Fluor 488-dUTP	1 ul
試劑（H）dATP	1 ul
共計	50 ul